TÉCNICAS BÁSICAS EN GENÉTICA

Existen dos técnicas básicas e importantísimas para el estudio genético de enfermedades:

1. PCR

La reacción en cadena de la polimerasa consiste en ampliar la cantidad de copias de una determinada secuencia de ADN, partiendo, teóricamente de una única secuencia original, que recibe el nombre de molde.

Su principal utilidad es facilitar la identificación de secuencias de ADN con una muy alta probabilidad, posiblemente asociadas a enfermedades. También sirve para detectar agentes patógenos en alimentos, por ejemplo.

Esta técnica se fundamenta en la actividad replicativa de las ADN polimerasas. La base de esta técnica es el uso de una ADNpol resistente a altas temperaturas que permite la copia de secuencias que han sido desnaturalizadas, de modo que la replicación es mucho más rápida. Las ADNpol usadas proceden de microorganismos procedentes de ambientes externos, generalmente, arqueas.

Por lo general, es una técnica común e indispensable en laboratorios de investigación para varias aplicaciones, como la detección de mutaciones o de secuencias asociadas a enfermedades congénitas.

2. Hibridación in situ

Esta técnica utiliza fragmentos de ADN o ARN marcados de modo que se acoplan a una secuencia específicamente y la localizan. Es especialmente importante en el análisis de la integridad cromosómica y de la formación de microdeleciones. También es muy importante para el estudio de translocaciones cromosómicas o duplicaciones y deleciones en el número de copias de un gen concreto. El procedimiento consiste en: primero, pretratar con un elemento fijador las células o tejidos para mantener los transcritos y las estructuras intactas. Después, se incuba la muestra con un ADN o ARN complementario marcado con un fluorocromo que actuará como tinción de fondo y con n marcadores génicos distintos. Después de descartar el exceso de marcador, se visualiza con un microscopio de fluorescencia para determinar la presencia o ausencia de marcador génico.

(6) Pedro